本研究成功建立了猪肾细胞(PK-15)模型的MHC Ⅰ类SLA-2、Ⅱ类SLA-DR、TAP1、等基因荧光定量RT-PCR标准曲线,证实这些基因的mRNA在猪瘟病毒感染后呈现下降,特别是MHC Ⅰ类SLA-2和 Ⅱ类SLA-DR的mRNA水平下降明显,说明猪瘟病毒对这些免疫应答基因呈抑制作用。研究发现,猪瘟病毒E2蛋白可影响MHC Ⅱ类SLA-DR的表达,合成引物扩增猪瘟病毒E2基因并构建真核表达载体,证实在PK-15细胞中猪瘟病毒E2蛋白的表达可增进MHC Ⅱ类分子SLA-DR的合成,说明猪瘟病毒E2蛋白在抗原递呈中发挥重要作用。利用芯片检测感染猪外周血单核细胞的基因转录状态。数据显示,CSFV感染后有847个基因改变,541基因上调,306基因下调。其中14.5%的基因参与免疫应答和抗原递呈,380个为未知功能的基因。猪瘟病毒感染的猪外周血单核细胞内MHC Ⅰ类SLA-2和Ⅱ类SLA-DR基因呈现下调状态。选取SLA-2等14个基因用实时定量PCR对芯片结果进行验证,两种方法结果一致。
英文主题词Classical swine fever virus (CSFV); E2 gene; peripheral blood mononuclear cells (PBMC); MHC class molecules; Real-time PCR