中文摘要：

青光眼至今发病机制不明，高眼压不能解释所有的病理过程，近年来发现血管自身调节异常与青光眼关系密切，但关于调节异常的机制尚不明确，作为血管调节的结构基础- - 血管内皮细胞在青光眼中是否有变化呢？我们前期工作发现，慢性高眼压下视网膜血管内皮细胞的超微结构有改变，那其血管活性和细胞骨架有无变化？作为血视网膜屏障的重要组成部分，其通透性有无变化呢？本课题通过建立大鼠慢性高眼压模型，不同时间点取材根据轴突计数和RGC逆行标记判断神经损伤程度；检测静脉血中内皮素-1浓度和循环内皮细胞数量；用离体灌注眼球的方法检测血管对活性物质反应性的变化；F-actin染色观察细胞内骨架变化；Occludin、claudin-5标记，透射电镜，及FITC-右旋糖酐法检测内皮细胞通透性。由此揭示视网膜血管内皮细胞在慢性高眼压下的变化,及其在青光眼性视神经损伤中的作用，深入探讨青光眼的发病机制，并提供一个可能的治疗靶点。

结论摘要：

本项目基本按照研究计划进行，取得了初步成果。由于对SD大鼠用单纯结扎巩膜上静脉的方法造模，成功率不是很高，换用了DBA/2J的小鼠模型；研究内容的重点放在了血管内皮细胞紧密连接蛋白的检测上，从PCR、Western Blot、电镜等方面进行了研究。采用C57小鼠做正常对照，RT-PCR发现Occludin在DBA2J中未检测到，而在C57中有表达；Claudin-1在两组均有表达；Claudin-5、Claudin-3、ZO-1在两组均有低水平表达，且相差不大。Western Blot结果显示，Occludin和Claudin-1 在两组中结果均阳性，且在DBA2J组表达低于正常对照组；而Claudin-5结果阴性。将视网膜送透射电镜观察，发现在DBA2J组的视网膜血管损伤性改变明显，管腔皱缩，紧密连接模糊欠清，轴突空泡样改变，而C57组血管、轴突结构均正常。研究发现在小鼠慢性高眼压模型中，视网膜血管存在损伤性改变，且血管内皮细胞紧密连接较正常减少，揭示可能存在血管通透性增加，这在整个病理过程中的作用有待进一步探讨。