中文摘要：

血小板减少症主要见于骨髓增生异常综合症，恶性肿瘤放化疗后、红斑狼疮等多种难治性疾病中，对人类健康危害极大。迄今，国内外治疗血小板减少症尚无理想药物。骨髓巨核细胞是血小板的前体细胞，其增殖分化成熟与否直接影响外周血中血小板的数量，直接影响各种难治性疾病的临床治疗。因此，研究促骨髓巨核系细胞增殖的药物对于提高治疗效果具有极其重要的意义。本课题组前期研究发现肿节风总黄酮及其含药血清均能促进骨髓巨核细胞和巨核系祖细胞增殖，但促进巨核系细胞增殖的物质基础尚不明确。本课题拟采用数学分离的方法，首次引入偏最小二乘法处理多成分与效应之间关系，进行先数学分离后物理分离肿节风总黄酮活性成分，以大鼠骨髓巨核系细胞的原代培养为效应评价手段，探索一种中药活性成分分离的新方法的合理性，为中药活性成分提供新的分离模式，并阐明肿节风总黄酮促巨核系细胞增殖的物质基础，为进一步开发治疗血小板减少症的药物成分提供科学依据。

结论摘要：

中药药效物质基础是中药质量控制的基础与核心。由于中药作用的整体性、中药成分和作用机制的复杂性，寻找适合于中药复杂体系的药效物质基础的研究方法，阐明中药药效物质基础及作用的本质，是中药研究的关键问题。目前中药药效物质基础分离筛选研究方法大多具有一定的局限性，本研究以肿节风总黄酮经时血浆物质变化为X矩阵，以肿节风总黄酮经时含药血浆促进骨髓巨核细胞增殖的药理效应为Y矩阵，采用偏最小二乘法相关性分析筛选肿节风总黄酮促进骨髓巨核细胞增殖的物质基础，旨在探索并阐明偏最小二乘法应用于中药药效物质基础筛选的合理性。本研究研究结果如下 (1) 采用安捷伦1290系列快速分离液相色谱仪，安捷伦6538A四级杆-飞行时间串联质谱仪及ZORBAX Extend-C18色谱柱检测肿节风总黄酮经时含药血浆中各类物质成分的量，测定其分子量，并进一步分析各色谱峰，构建肿节风总黄酮经时含药血浆变化的X矩阵。 (2) Y矩阵研究结果显示肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg经时含药血浆对大鼠骨髓巨核细胞有明显的促增殖作用，均以肿节风总黄酮60、90 min 含药血浆作用显著。肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg经时含药血浆有降低大鼠骨髓巨核细胞培养体系中TPO含量，增加TGF-β1含量的作用，而对大鼠骨髓巨核细胞培养体系上清液中TSP-1含量无明显影响。 (3) 偏最小二乘法回归分析结果表明化合物A、化合物B、化合物C、化合物D、化合物E、化合物F以及化合物G可能是肿节风总黄酮促进骨髓巨核细胞增殖的物质基础。 (4) 进一步体外实验结果表明化合物A和化合物G均可显著促进大鼠骨髓巨核细胞的增殖，化合物A可降低大鼠骨髓巨核细胞培养上清液中TPO含量的趋势，可显著增加TGF-β1的含量，化合物G对大鼠骨髓巨核细胞培养上清液中TPO及TGF-β1含量影响不明显。 (5) 体内实验研究结果表明化合物A 40、20 mg/kg均可显著提高大鼠免疫性血小板减少症模型的血小板数目，化合物A是肿节风总黄酮促进骨髓巨核细胞增殖的物质基础。因而，本研究结果表明化合物A和化合物G是肿节风总黄酮促进骨髓巨核细胞增殖的物质基础，为进一步开发治疗血小板减少症的药物成分提供科学依据。本研究初步阐明了偏最小二乘法数学分离应用于中药药效物质基础筛选的合理性，为中药药效物质基础研究提供了新的分离模式。