中文摘要：

survivin在食管癌肿瘤组织中异常高表达，但机制不详。我们前期的研究发现survivin启动子-625G/C多态位点与食管癌中survivin高表达相关。生物信息学分析显示，此位点为C的survivin启动子能形成组蛋白乙酰转移酶p300蛋白的特异结合序列。本研究通过转染p300基因入食管癌细胞及siRNA抑制p300蛋白表达两方面观察转染入食管癌细胞中的survivin启动子转录活性及启动子区组蛋白乙酰化状态的改变情况，同时利用收集的食管癌肿瘤组织及癌旁正常组织标本，分析survivin表达、survivin启动子区组蛋白乙酰化水平及p300蛋白募集情况，证明食管癌中-625G/C位点为C的survivin启动子通过p300改变启动子区的乙酰化状态从而导致survivin高表达。本项目的研究结果对阐明survivin在食管癌中异常表达的调控机制具有重要的科学意义。

结论摘要：

本研究立题目的是要证明食管癌中-625G/C位点为C的survivin启动子通过p300改变启动子区的乙酰化状态从而导致survivin高表达。首先我们构建了-625G和-625C survivin启动子重组荧光素酶报告质粒，将其和p300蛋白或p300干扰RNAi一起，转入培养的食管癌细胞（Eca109，TE-1）中，观察survivin启动子活性以及survivin蛋白、mRNA的表达情况。发现，p300蛋白确能影响survivin启动子活性，进而也能影响食管癌细胞中survivin蛋白表达，但是对-625位点不同基因型的启动子的影响没有差异。我们的实验结果表明，survivin启动子-625G/C多态性致survivin高表达的机制与p300蛋白关系不大。虽然没有达到预期的研究目的，但是总结我们所做的实验结果可以得出这样的结论，转录因子p300能够影响食管癌细胞中survivin的表达.此部分研究结果为揭示survivin在食管癌中异常表达的机制也能提供一些线索。本项目还在脐带间充质干细胞hUCMSCs对食管癌的影响方面做了一些研究。由于hUCMSCs独特的特性，其已经成为骨髓来源间充质干细胞很好的替代品。然而，有关干细胞的实验多数针对BMMSCs，鲜有涉及hUCMSCs的报道。在我们的实验中，将hUCMSCs和食管癌肿瘤细胞一起注射到裸鼠右侧腋部皮下观察hUCMSCs对食管癌肿瘤成瘤的作用，结果显示，hUCMSCs促进食管癌细胞在裸鼠体内成瘤。在已经建立的裸鼠食管癌模型中，将hUCMSCs从尾静脉注射进入荷瘤裸鼠能够显著促进裸鼠体内肿瘤生长。我们的体外实验表明，当和hUCMSCs共培养以后，食管癌细胞增殖能力增强。通过transwell实验将hUCMSCs和食管癌细胞共培养后我们发现，食管癌细胞可以吸引hUCMSCs，hUCMSCs细胞能够促进食管癌细胞的迁移和侵袭能力。Westernblotting实验结果显示，和hUCMSCs共培养以后，食管癌细胞中与增殖和生长相关的蛋白Bcl-2、survivin以及与肿瘤转移相关的蛋白MMP-2，MMP-9的表达水平均有提高。此部分研究结果显示，hUCMSCs在体内、外均可促进肿瘤生长。如今，应用干细胞治疗多种疾病在临床上开始应用，但是在体内存在恶性疾病的患者中，应用干细胞治疗时要特别注意干细胞对恶性疾患的促进作用。