中文摘要：

高效液相色谱已成为现代分离分析技术中一种最重要的手段。为适应生化分离，特别是生物技术产品分离纯化和生命科学中高效、高通量分离分析之需，亟待发展具有高机械强度、可在高压、高流速和高通量条件下操作且具有优异化学稳定性和生物相容性的新型分离材料。本项目拟利用可控的相分离技术结合本实验室发展的一步溶胀聚合制球技术，研制出兼具快速、高效、高通量，且生物相容性好、微米级粒径单分散的双孔型交联全聚甲基丙烯酸环氧丙酯（PGMA）微球。以此微球为基质，以免疫球蛋白G（IgG）为模型目标蛋白质，构建流动注射-石英晶体微天平（FIA-QCM）亲和配基筛选平台，收集并建立实物小分子药物库，从其中筛选适宜的小分子药物配基，进而研制出能选择性地分离IgG的高效亲和色谱介质，并对此新型介质用于高效、快速、高通量生化分离的色谱行为和能力进行评价与考察，为复杂生物体系的分离分析提供新的方法与手段。

结论摘要：

开展了微米级粒径单分散的双孔型交联全聚甲基丙烯酸环氧丙酯（PGMA）微球材料的研究，发展了基于一步溶胀聚合以及可控相分离技术的双孔PGMA制备新方法，研制出大孔孔径大于500 nm，中孔孔径为几十纳米的双孔结构粒径均匀全PGMA微球，显示了良好的通透性、高的化学稳定性、以及良好的生物相容性。构建了流动注射-石英晶体微天平（FIA-QCM）新系统，基于QCM实时、动态、免标记的优点，开展了针对免疫球蛋白G（IgG）的小分子药物筛选研究；开展了具有信号放大效应的QCM传感新体系研究。制备了高亲水性PGMA强阳离子交换色谱填料，实现了蛋白质的快速、高效分离分析。以PGMA微球为基质，以癌症相关蛋白LAPTM4B第二胞外区EL2片段为亲和配基，构建了高效亲和色谱体系，筛选出AP2H多肽探针，实现了对肝癌细胞LAPTM4B蛋白的识别、定位与动态分析。