真核细胞的分化过程极为复杂、精细,且在时间、空间上具有严格的程序调节特性。因而,也具有动态和不可逆性。细胞分化的信息,既寓于其基因组中,也反映在参与细胞分化过程的所有调控因子及分化产物的变化之中。开展真核细胞分化过程中信息基础的研究,就必须进行动态、实时的监测,本项目拟将基于石英晶体微天平(QCM)的生物传感器、微透析取样-mHPLC分析系统以及进行形态观测用的CCD-光学显微镜联用,建立真核细胞
本项目基于石英晶体微天平(QCM)生物传感器建立真核细胞分化动态监测系统,以肝癌细胞为真核细胞研究模型,建立了LAPTM4B超表达和低表达的四个细胞系,开展了QCM检测池、电解泵的研制,设计、构建了细胞QCM传感器,进行了动静态细胞贴壁、增殖等研究,实时原位检测了细胞贴壁、生长过程中的频率变化。为提高QCM的生物相容性和检测灵敏度,以PGMA和纳米金颗粒对石英晶片表面进行了改性,取得了良好结果。开展了细胞增殖、分化过程中标志蛋白质检测新方法研究,以LAPTM4B蛋白EC2为靶点,基于反义肽的简并性,以高效亲和色谱法筛选到了高选择性、高亲和力反义肽探针AP2-3,以此进行了EC2的检测以及肝癌细胞粘附的研究。还开展了以蛋白质分子印记聚合物为传感元件的QCM生物传感研究,为蛋白质生物标志物的检测提供了新的途径。