地衣芽孢杆菌是一种广泛应用的具有高效蛋白分泌能力的革兰氏阳性菌,不同蛋白分泌效率的差异与其N端的信号肽序列密切相关。目前研究认为信号肽的序列不具有保守型,但其氨基酸组成、性质和结构是影响分泌效率的主要因素。本项目通过在地衣芽孢杆菌中构建高库容的内外源信号肽文库并结合高通量筛选技术获得高分泌效率的信号肽序列,同时通过对信号肽进行不同区域的饱和突变,利用Pulse-Chase体内实验和生物信息学综合分析,解析信号肽不同氨基酸组成、性质、结构对分泌效率的影响机制,从而为信号肽的理性设计奠定基础。
英文主题词Bacillus lichniformis;signal peptide library;high-throughput screening;thermostable amylase;