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日本血吸虫抗独特型抗体全人杂交瘤细胞的建株及鉴定
  • 项目名称:日本血吸虫抗独特型抗体全人杂交瘤细胞的建株及鉴定
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30371259
  • 申请代码:H1906
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:冯振卿
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:南京医科大学
  • 批准年度:2003
中文摘要:

申请者已制备出具有自主知识产权的鼠源日本血吸虫单克隆抗独特型抗体,命名NP30。实验证明NP30具有模拟抗原的作用,主动免疫小鼠、山羊可诱导较强的抗感染免疫和抗病免疫作用,是一有希望的血吸虫病疫苗候选分子。但其中的鼠源成份限制了NP30在人体血吸虫病免疫预防中的应用。本研究应用处于国际前沿的人-人杂交瘤技术,将人骨髓瘤细胞株Karpas 707H与晚期血吸虫病患者的B淋巴细胞株融合,建立人-人杂交

结论摘要:

申请者已制备出具有自主知识产权的鼠源日本血吸虫抗独特型抗体NP30,为一有希望的血吸虫病抗独特型抗体疫苗候选分子,但其中的鼠源成份限制了NP30在人体血吸虫病免疫预防中的应用。本研究应用人-人杂交瘤技术,筛选具有NP30模拟抗原表位特异性的人-人杂交瘤细胞株,使之能分泌全人抗体。取晚期血吸虫病患者脾脏淋巴细胞,体外经PHA刺激,与处于对数生长期的人骨髓瘤细胞株Karpas 707H采用电融合方式进行细胞融合,经选择性培养,共获得7株血吸虫抗独特型抗体人-人杂交瘤细胞株。同时,取晚期血吸虫病患者脾脏淋巴细胞,构建了人源血吸虫病Fab噬菌体抗体库,库容为4.3×106,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。ELISA鉴定有4个克隆为血吸虫抗独特型抗体(A3、B6、C4、C17),属全人 Fab抗体,其中B6经SDS-PAGE显示插入片段正确。本项目应用的人-人杂交瘤技术有待进一步完善,构建的人源血吸虫病Fab噬菌体抗体库,为制备用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础,也为构建其他全人单抗,开发具有我国自主知识产权的抗体药物,建立了一个科学性与实用性相结合的技术平台。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 2
  • 0
  • 0
  • 0
  • 0
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