本课题筛选出细胞因子IL-2、IL-6可明显提高日本血吸虫抗独特型抗体NP30的保护作用,减虫率从单用NP30的40.6%分别提高到53.5%和55.7%。分离、扩增NP30轻链可变区(VL)、重链可变区(VH)基因,并进行序列分析。VL基因全长318bp,内无起始密码子及终止密码子,编码106个氨基酸。VH 基因全长357bp,内无起始密码子及终止密码子,为一开放阅读框,编码119个氨基酸。VL 、VH基因序列已被Gene Bank收录,登录号分别为AF206720和AF282622。在此基础上,构建了NP30单链抗体(ScFv)基因,表达产物经ELISA检测具有抗体结合活性。应用分子生物学软件,证明VH CDR3区的10个氨基酸片段可能为其抗原位点,人工设计合成VH CDR3区6倍重复表位基因序列(6xVHCDR3),与IL-2基因整合,表达融合蛋白,主动免疫小鼠,减虫率可达48.5%。本课题为研制糖表位抗原疫苗提供了一条新途径,也为进一步研制人用血吸虫病抗独特型抗体疫苗奠定了基础。
英文主题词Schistosoma japonicum;Anti-idiotypic antibody;Sequence analysis