依托山东传统出口型大花生等优质花生资源,在杂交富集、建库、筛库基础上,辅以数据库查询、借鉴其它近缘生物引物序列等策略分离开发花生SSR标记;选择多态性高的亲本,搭配杂交组合,建成F2代分离群体,综合利用SSR、AFLP等多种分子标记技术,构建花生分子连锁框架图,为花生基因分型、基因(座)定位、基因克隆和标记辅助选择创造条件。
通过数据库查询、借鉴近缘植物SSR/STS引物等方法,开发出103对SSR/STS引物。建立了简捷、高效筛选文库分离花生微卫星的技术流程。提供272条花生DNA测序。根据序列测定结果除去冗余序列,成功设计出123对微卫星引物。利用10个中国花生品种,评估了蛋白质电泳、AFLP、SRAP、SSR/STS、RGA技术在区分相近来源花生品种上的应用效果。结果表明SSR技术效果较好。研究了花生不同限制酶组合AFLP分析的效果,结果表明Pst I/Taq I比EcoR I/Mse I组合在花生上更为有效。综合运用RGA、SRAP、SSR/STS、AFLP等技术,我们已获得三百多个多态性遗传标记,通过上群体进行基因分型,采用JoinMap 3.0软件测试分离比、做连锁分析,已完成花生分子连锁框架图构建。