Prmt5是蛋白质精氨酸甲基化酶,在RNA剪接、免疫、细胞周期调控、胚胎发育和生殖细胞发生中发挥重要作用,但尚无Prmt5对生殖细胞发生过程的基因表达及生殖干细胞维持影响的研究报道。鱼类Prmt5的研究也很缺乏。我们以青鳉为对象,已经克隆了其Prmt5基因并进行了表达模式研究。在此基础上,本项目将进行胚胎显微注射以敲降或过量表达Prmt5,并对雄性生殖干细胞进行Prmt5的敲降或基因转移,研究Prmt5在生殖细胞发生、迁移和分化及在生殖干细胞维持中的作用,分析其作用机制是通过对特异基因基因表达的影响还是对细胞增殖与凋亡的影响,探索Prmt5与其他相关基因的相互作用。本项目的完成将深刻了解Prmt5在鱼类生殖细胞发生、迁移过程中的作用机制以及其在生殖干细胞维持和分化中的作用,为水产鱼类生殖发育及生殖干细胞研究提供重要参考。
Prmt5;medaka;germ cells;development;gene expressionn
我们已经合成了Prmt5的morpholino,构建了prmt5的表达载体pCS2+Prmt5,合成了Prmt5的mRNA。Morpholino和Prmt5的显微注射和相关表型分析工作正在进行中。在执行上述研究工作的同时我们还研究了青鳉生殖相关基因piwi1、piwi2的表达模式;研究了青鳉Ol4E-T与vasa、nanos3等的相互作用,初步证明了Ol4E-T在生殖细胞发生中的作用;还研究了稀有鮈鲫性腺形成和性腺发育分化的分子调控。正在培养硕士研究生3名,发表SCI论文4篇。