中文摘要：

在广西各种常见基因型的β地中海贫血（β地贫）患者中，应用脂质体转染反义核酸技术在体外单独或同时封闭其红细胞内α珠蛋白基因及缺陷突变的β珠蛋白基因的异常剪接位点，采用红细胞体外液体培养技术、荧光定量RT-PCR技术、免疫印迹及流式细胞术等方法检测封闭前后红细胞内α珠蛋白基因及β珠蛋白基因mRNA水平的变化，观察其能否达到纠正α与非α珠蛋白链的比例失衡，增加HbA的合成，减少红细胞内包涵体的形成，减少溶血和骨髓无效红细胞生成的作用，本项目从基因水平调控β地贫患者红细胞内珠蛋白链的合成，为探讨反义技术治疗β地贫寻找新的靶点及最佳途径，为将来指导实验及临床研究β地贫的基因治疗提供新的思路。

结论摘要：

在广西各种常见基因型的β地中海贫血（β地贫）患者中，应用脂质体转染反义核酸技术在体外封闭其红细胞内α珠蛋白基因，采用红细胞体外液体培养技术、荧光定量RT-PCR技术、高效液相及电镜等方法检测封闭前后红细胞内α、β及γ珠蛋白基因mRNA水平及α珠蛋白肽链变化情况。实验结果提示（1）一步法红系细胞体外液体培养体系能在体外更好的模拟红系细胞分化过程，为体外研究地贫提供了良好的实验模型；（2）设计、合成多条反义寡核苷酸链，经脂质体转染作用于稳定表达α-珠蛋白基因的K562细胞株，筛选出封闭效率最佳的一条，并获得最佳作用浓度和作用时间；（3）将筛选获得的反义寡核苷酸链作用于体外培养β地贫红细胞，该反义寡核苷酸链能特异性封闭β地贫红细胞的α珠蛋白基因，同时对β、γ珠蛋白基因表达无明显影响，纠正了α与非α珠蛋白基因比例失衡，减少了红细胞内过剩α珠蛋白链合成，减轻了因过剩α珠蛋白链沉积所致红细胞破坏，延长了地贫患者的红细胞寿命，使其不断分化、成熟，不致过早破坏。本项目从基因水平调控β地贫患者红细胞内珠蛋白链的合成，为探讨反义技术治疗β地贫寻找新的靶点及最佳途径，为将来指导实验及临床研究β地贫的基因治