从已获取的红球菌Rhodococcus BET-2原始脱硫菌出发,采用分子生物学的基本原理与方法,挖掘原始脱硫菌诸如相关酶基因结构与功能、代谢途径及代谢机理等基本生物信息;采用激光定位诱变育种技术与基因重组技术相结合的方法构建超级基因工程脱硫菌;并在摇瓶和7L全自动发酵罐上对水相、模拟油相和真实柴油体系中的发酵过程进行优化和油-水界面强化技术研究;最后在50L全自动发酵罐上开展方法技术研究与验证,考察放大效应和放大规律。形成具有我国独立知识产权的高效、经济、实用、安全的柴油生物脱硫新技术。