本项目首先建立了水浮莲及浮萍再生及转化系统;采用 I-PCR 从浮萍基因组中克隆了长度为1491bp 的新的rbcS 基因启动子SSU5C,并将其与GUS 基因融合进行了组织表达、功能分析和5’端缺失分析;采用不同表达系统(包括植物表达系统)表达了具有活性的VP2蛋白和禽流感病毒M2蛋白,含有重复表位的3sM2蛋白激发产生的免疫血清为流感病毒A/PR/8/34(H1N1)侵染的MDCK细胞提供了更好的保护力。此外,以本项目的研究对象浮萍为宿主,建立了一种新型的病原细菌-宿主的感染模型。该模型采用24 孔板检测了不同病原细菌对浮萍生长和毒力的影响,并检测了与感染和毒力相关基因的缺失和过表达对浮萍的影响。该模型具有通量高、灵敏度高、成本低、重复性好等优点,可以用于病原细菌毒力检测、功能基因的验证以及抗病原细菌化合物的筛选。项目执行期间发表论文5篇,其中SCI论文3篇,培养博士、硕士研究生5名。
英文主题词Pharmeceutical protein; Protein expression system; water lettuce; duckweed; pathogen-host interaction