按任务书中研究计划内容正常进行。工作计划围绕蚯蚓免疫生态防御与分子机理,开展了下列5个方面的研究(1)应用mRNA差异显示技术结合Reverse Northern杂交技术研究重金属镉诱导蚯蚓差异表达基因。(2)建立适于蚯蚓双向电泳及质谱分析的蛋白质提取方法。为蛋白质组学应用在无脊椎动物蚯蚓上打下坚实基础。(3)蚯蚓应对重金属镉胁迫下的差异蛋白质组学研究,共得到143个差异蛋白点,MALDI-TOF/TOF-MS成功鉴定56个蛋白点。至少在一个时间点有28个蛋白上调,28蛋白下调。(4)利用抑制消减杂交技术(SSH)研究蚯蚓应对致病性大肠杆菌O157:H7胁迫下基因表达的影响,这些差异基因将加大我们对蚯蚓抗菌免疫应激的分子机制的理解。(5)证实蚯蚓粪中存在可以抑制E.coli O157:H7生长的益生菌株。利用选择性培养的方法分离得到对E.coli O157:H7生长具有抑制作用的LS-2、LS-3、LS-4,并初步鉴定为短乳杆菌属、魏氏利斯特菌属、乳酸片球菌属,并证实培养温度和初始pH对抑菌效果具有显著影响。
英文主题词Eisenia fetida; SSH; Proteomics; Cadmium;Escherichia coli O157:H7