中文摘要：

浸润转移及化疗耐药是胃癌治疗失败的主要原因，寻找能有效抑制胃癌浸润转移并逆转其耐药的新靶点，目前已成为胃癌靶向治疗的关键问题。本项目的前期研究表明，EGFL7在胃癌的浸润转移及耐药形成过程中可能发挥了重要作用，且其效应结构域不清。本项目拟从胃癌浸润转移及耐药与微环境的内在联系角度，通过三维细胞培养、EGFL7过表达及shRNA干扰、transwell小室检测、FCM以及裸鼠成瘤等方法，探讨EGFL7表达水平的变化对胃癌浸润转移及耐药的影响；在此基础上，利用生物信息学分析EGFL7结构域构成， 一步PCR法构建表达缺失突变体等，筛选其效应结构域。本项目不仅有利于揭示EGFL7对胃癌浸润转移及耐药的双重调控作用，更为进一步利用计算机辅助设计小分子抗肿瘤药物提供了新的靶点，为临床抗胃癌浸润转移、逆转其耐药提供了新思路。

结论摘要：

浸润转移及化疗耐药是胃癌治疗失败的主要原因，寻找能有效抑制胃癌浸润转移并逆转其耐药的新靶点，已成为胃癌靶向治疗研究的热点。本项目从胃癌浸润转移及耐药与微环境的内在联系角度，通过一系列方法，探讨了EGFL7表达水平的变化对胃癌浸润转移及耐药的影响。结果发现，EGFL7在胃癌组织中呈高表达，并与浸润深度、淋巴结转移呈正相关；同时，检测MMP9、LRP1及Bcl-xL等的表达状态，结果发现EGFL7与它们的表达呈正相关，这就提示EGFL7可能参与了胃癌的浸润转移，并对胃癌耐药的产生可能有一定的影响；为证实此观点，本课题组筛选多株胃癌细胞后发现EGFL7在BGC823中表达最高，而在MKN28细胞株中表达最低，随后以它们为研究对象，分别运用过表达、shRNA改变EGFL7的表达水平，检测它们浸润、迁移能力的变化及对顺铂的敏感性，同时运用裸鼠成瘤技术在体内EGFL7表达变化对上述生物学行为的影响，结果发现，升高EGFL7表达水平可显著促进胃癌的浸润、转移，而降低其表达则可显著降低其浸润及转移能力；同时在体外实验中，我们发现改变EGFL7可显著影响LRP1的表达，但在体内实验中，裸鼠移植瘤的变化没有统计学意义，这可能与影响胃癌耐药的多因素有关，具体机制有待进一步的研究；在后续实验中，本课题组构建了EGFL7结构域表达缺失突变体，分别进行了浸润、转移及耐药相关的研究，结果发现EMI/EGF结构域与浸润转移有关。在探讨EGFL7对胃癌侵袭转移的影响的过程中，本课题组发现改变EGFL7表达对胃癌细胞的形态有较明显的影响，表现为上皮型及纤维型间的转化，由此本课题组进一步探讨了EGFL7与上皮间质转化（EMT）间的关系，结果发现在胃癌组织中，EGFL7与Vimentin及Snail的表达呈正相关，而与E-cadherin呈负相关；降低BGC823中EGFL7的表达，可使Vimentin及Snail表达降低，而E-cadherin升高；在MKN28细胞中过表达EGFL7， Vimentin及Snail的表达则升高，而E-cadherin降低，这就提示EGFL7促胃癌侵袭转移的作用可能与其诱导了EMT有关；进一步的研究发现此过程的机制可能与EGFL7对EGFR/AKT通路的活化有关。