沙眼衣原体不仅可以导致沙眼,其感染所致的性传播性疾病已成为感染人数最多的性病之一。沙眼衣原体感染上皮细胞后可以诱导多种细胞因子的分泌及粘附分子的表达,在诱导天然免疫反应、启动特异性免疫反应和趋化特异性CD4+ Th1 细胞归巢等免疫反应中发挥了重要的作用。到目前为止基本上还不清楚哪些沙眼衣原体的菌体成分可以诱导这些细胞因子的分泌及粘附分子的表达。发现能诱导免疫及炎症反应的沙眼衣原体菌体成分将有助于了解保护性免疫反应以及免疫病理损害的机理,为发展疫苗奠定基础。细胞因子的产生以及粘附分子的表达受到转录因子的调控,而转录因子NF-kappaB已经证明在它们的调控中起了关键的作用。因此我们计划用NF-kappaB GFP荧光报告基因的技术来筛选能激活NF-kappaB的沙眼衣原体蛋白分子,并研究这些蛋白分子在诱导免疫及炎症反应中的作用。根据文献检索,在沙眼衣原体的研究中还没有利用该技术的报道。
沙眼衣原体所致性传播性疾病已成为感染人数最多的性病之一。我国沙眼衣原体所致性传播性疾病的发病率不断上升,城市已婚妇女的平均感染率在4.4% - 5%。沙眼衣原体感染可以诱导多种细胞因子的分泌及粘附分子的表达,在激活天然免疫反应、启动特异性免疫反应和趋化特异性CD4+ TH1 细胞归巢等免疫反应中发挥了重要的作用。到目前为止还不清楚哪些沙眼衣原体的大分子可以诱导这些细胞因子的分泌及粘附分子的表达。在本研究中我们应用生物信息学方法对沙眼衣原体候选分泌性蛋白分子进行了分析和筛选,选择了可通过III型分泌系统分泌到细菌外的候选蛋白分子作进一步研究。构建了沙眼衣原体D型CT083、CT550和CT848全基因真核细胞表达载体,经酶切和测序鉴定,克隆的基因及插入顺序与设计的完全一致,证明三个真核表达载体构建成功。将CT083、CT550和CT848基因真核表达载体分别与NF-?kappaB荧光素酶报告基因载体共转染HeLa细胞,发现沙眼衣原体D型CT083、CT550和CT848蛋白分子在激活NF-?kappaB中没有明显的作用,可能不能单独诱导炎症反应。