中文摘要：

Ubap1是一个定位于人类染色体9p21-22等位基因杂合性丢失高频区的多肿瘤抑制候选新基因。作为一个UBA domain蛋白超家族的新成员，我们将首先考察Ubap1基因与泛肽的相互作用，并采用酵母双杂交和免疫共沉淀方法筛选、确定与Ubap1基因相互作用的其他蛋白质；进一步以鼻咽癌细胞为研究模型，确定Ubap1基因的稳定重表达及阻断泛肽通路前后对肿瘤细胞基因组及蛋白质组的影响，筛选其作用的靶分子及信号通路，对通路中关键性的调控分子进行研究，寻找Ubap1基因在具体信号通路中的作用环节。最后通过构建不同UBA domain缺失的Ubap1基因突变体，分别在细胞和动物模型水平研究UBA domain对Ubap1基因功能的影响。本项目的完成为彻底阐明Ubap1基因及其UBA domain参与肿瘤(鼻咽癌)发生发展的分子机制开辟了一个新的视野。

结论摘要：

UBAP1基因是我室采用定位候选克隆策略克隆得到的一个鼻咽癌相关新基因，该基因在鼻咽癌中表达下调，生物信息学预测包含一个保守的UBA domain。本项目通过采用生物信息学方法，获得人UBAP1基因数字差异表达谱。通过构建UBAP1真核表达载体转染鼻咽癌细胞HNE1发现，UBAP1A编码蛋白主要定位于胞核，并存在较明显的核膜聚集现象。稳定转染UBAP1基因的HNE1细胞增殖速度明显减慢，致瘤能力降低，UBAP1 基因的表达有助于HNE1 恶性表型的逆转，初步证明UBAP1 基因是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因。构建pGEX－UBAP1原核表达载体，在大肠杆菌中高效表达并纯化得到GST-UBAP1融合蛋白，免疫新西兰兔制备高效特异的抗UBAP1抗体，应用该抗体结合自制的包含316个点的鼻咽癌组织芯片进行免疫组化检测发现，UBAP1蛋白在鼻咽癌中的阳性表达率（23.0%）显著低于非鼻咽癌组织（89.0%）(P<0.01)。利用抗UBAP1 的多克隆抗体能较好地排除非NPC 患者，表明其在诊断NPC 方面具有潜在的临床应用价值，同时说明UBAP1参与了鼻咽上皮的恶性转化过程。