中文摘要：

骨髓间充质干细胞（BMSC)不仅有自我更新、多向分化潜能，还有免疫调节作用，在组织修复、自身免疫病治疗中具潜在应用价值。BMSC的免疫调节机制研究备受关注。B7-H4是新近发现的负性协同刺激分子，实验组前期研究表明B7-H4组成性表达于BMSC并介导其对T细胞的免疫调节作用，但具体机制尚待进一步探讨。本研究拟以神经系统自身免疫病多发性硬化（MS）为切入点，结合临床和MS的动物模型实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE），利用组成性表达B7-H4的小鼠间充质干细胞（MSC）株C3H10T1/2，自主研发的抗B7-H4单克隆抗体和B7-H4 Ig融合蛋白等干预B7-H4信号，明确MSC表达的B7-H4在治疗EAE中的体内效应及途径，探讨B7-H4在MSC免疫调节中的作用机制，尤其对T细胞极化、调节性T细胞和树突状细胞等免疫细胞和分子的作用及效应途径，为MS等自身免疫病的治疗开拓新的靶分子和途径。

结论摘要：

本项目旨在明确B7-H4 在C3H10 细胞移植于EAE小鼠后的初步效果,探讨B7-H4在MSC治疗MS中的作用及机制。已有结果显示（1）MSC细胞株C3H10移植治疗MS模型EAE安全、有效,可减轻发作程度，减少组织损伤，病灶周围存在极少量GFP标记的C3H10细胞；B7-H4靶向干扰的C3H10(C3H10-ShRNA-B7-H4)移植组较阴性对照组和C3H10移植组EAE神经功能缺损评分高，组织损伤重，炎性细胞浸润明显；各移植组均未见肿瘤发生。（2）表达B7-H4的C3-H10能抑制PHA激发的小鼠脾淋巴细胞的增殖和活化，阻滞细胞周期于G0/G1期，保护其免受活化诱导的细胞凋亡（AICD）；而下调B7-H4后C3H10的上述作用被逆转。（3）下调B7-H4的C3H10细胞凋亡比例增加；且表面趋化因子受体CXCR4表达明显下调；这与人骨髓MSC（hBMSCs）的研究结果一致。（4) 研究期间，Podojil JR等的论文发表，证明了B7-H4Ig在EAE中通过IL-10/Treg机制发挥免疫抑制作用，这与本实验组预期设想一致。（5）另外，实验组对不同协同刺激分子在hBMSCs和胎盘源MSC（PDMSCs）免疫调节中的作用的研究结果显示hBMSCs组成性表达B7-H4，而PD-L1为诱导表达，而PDMSCs不组成性表达B7-H4，但组成性表达PD-L1和FasL,PD-L1对T细胞细胞周期、FasL对T细胞凋亡在不同时相发挥免疫抑制作用；另外，hBMSCs和hPMSCs对B细胞也发挥了免疫调节作用。(6）已有结果提示C3H10移植在EAE中主要通过免疫调节起治疗作用，而非替代损伤细胞；敲除B7-H4的C3H10除了免疫调节作用受损，其低免疫原性也受损，易凋亡，更早被机体的免疫系统清除，在体内维持活性的时间短暂。鉴于MSC移植较B7-H4 Ig治疗EAE既有促修复、又有免疫调节、减少组织损伤的作用，维持时间较长，代价低，且安全，更有优势。本项目初步结论是表达于C3H10的B7-H4在其免疫调节中，在其移植治疗EAE中起了重要的作用；B7-H4可作为EAE治疗的新靶点。基本证明实验预期结果。本项目已发表SCI 论文1 篇，部分实验结果已投稿，并受邀在国际神经修复协会第六届年会、中华医学会第十六届全国神经病学年会等上口头发言，培养研究生5名，一名已毕业。