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镉诱导华溪蟹金属硫蛋白的分离纯化与基因克隆
  • 项目名称:镉诱导华溪蟹金属硫蛋白的分离纯化与基因克隆
  • 项目类别:专项基金项目
  • 批准号:30640051
  • 申请代码:C190601
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2007-01-01-2007-12-31
  • 项目负责人:王兰
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:山西大学
  • 批准年度:2006
中文摘要:

金属硫蛋白(Metallothionein, 简称MT)是一类与生物体解毒有关的金属结合蛋白,具有非常重要的生理及生物学功能。本研究利用蛋白质分离、纯化、测序和基因克隆等高级生物化学及分子生物学方法和技术手段,以河南华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)为研究对象,对镉诱导下产生的MT进行分离、纯化、MTcDNA扩增及其基因克隆、MT基因亚型的比较、MT多态性及其生态服务功能

结论摘要:

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸、能被金属诱导并结合多个金属原子的特殊非酶蛋白质,广泛存在于动物、植物及微生物中。蟹类是低等指示生物在水体环境代表性的物种。故本实验以河南华溪蟹(Sinopotamon henanens)为材料,从毒理学、生化及分子水平对MT进行了深入系统的研究。内容主要包括:(1)镉诱导华溪蟹不同组织(肝胰腺,鳃、肌肉、卵巢)MT的表达及镉蓄积状况,并探讨二者之间的关系。(2)经镉诱导,丙酮沉淀,Sephadex G-50凝胶过滤层析,DEAE-Superose Fast Flow离子交换层析,透析脱盐,冷冻干燥,从肝胰腺中分离纯化了MT,得到了纯度较高的华溪蟹MT,其主要以单体及二聚体形式存在,分子量分别为6890.6Da及13766.5Da。(3)经RT-PCR 扩增MT cDNA片段,进一步以3'-Race 及5'-Race法扩增3'端及5'端基因序列,获得了633bp的MT cDNA全长序列,阐明了华溪蟹MT的一级结构,补充完善了水生无脊椎动物MT的研究内容,为利用MT进行环境监测及重金属污染治理奠定了科学基础。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 6
  • 0
  • 0
  • 1
  • 0
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