中文摘要：

本研究以鼠疫菌三个已知与毒力相关蛋白LcrG，YscW，YscB为研究对象，构建了三种突变株，分析了突变株的巨噬细胞毒性和小鼠的LD50，发现突变株的毒力在细胞水平上和感染模型上都有显著下降。被突变株感染的巨噬细胞分泌TNF-alpha的能力显著低于野生型菌株，说明突变株不能象野生型菌株一样有效的抑制宿主的免疫响应。为了寻找他们在宿主体内的作用靶标，我们构建了小鼠J774A.1巨噬细胞的cDNA文库，采用细菌双杂交技术以LcrG和YscW为诱饵筛选小鼠巨噬细胞cDNA文库，分别获得了猎物分子Rlp3、Trx2和Rnf149。以YscB为诱饵筛选人脾脏cDNA文库获得了猎物分子PLSCR1，EFEMP2，TSG101，经酵母回转试验验证均为阳性。在此基础上系统的研究了yscW突变对巨噬细胞功能的影响。用yscW突变株感染巨噬细胞，发现巨噬细胞对yscW突变株和鸡红细胞的吞噬能力均显著大于野生型菌株，巨噬细胞的抗原提呈能力显著高于野生型菌株。研究结果初步阐明三种毒力因对鼠疫菌细胞毒性和小鼠毒性的影响，并且表明他们是抑制巨噬细胞的吞噬功能和抗原提呈能力所必须的。