岩藻糖化寡糖LeY和sLeX与子宫内膜的胚胎接受性密切相关并受到关注。本课题拟建立灵敏特异的LeY/sLeX糖蛋白的凝集素-亲和ELISA检测方法,并分析正常人及不孕症患者子宫内膜组织和宫腔液、不同胚胎接受性内膜细胞中LeY/sLeX糖蛋白的表达差异。以特征性寡糖指标客观评价内膜接受性的新方法,为不孕症病因分析提供了基础。利用基因转染方法分析LeY和sLeX的合成关键酶-岩藻糖基转移酶FUT4和FUT7的调控作用。观察LeY/sLeX糖蛋白介导的母-胎黏附作用,提出并拟通过验证此种黏附可促进内膜细胞凋亡的观点。将靶向糖蛋白质组学方法应用于胚胎着床研究中,分析LeY/sLeX糖蛋白表达谱的规律,并筛选差异性表达的重要着床分子进一步研究其性质及功能。为糖生物学研究与生殖医学结合的交叉领域,有助于研究寡糖在生殖中的作用机制,并为以寡糖为靶点的避孕和助孕临床干预提供新思路。
Fucosyl transferase;endometrium;embryo;adhesion;sugar chain
子宫内膜LeY/sleX糖蛋白的分析及其在胚胎着床中作用的研究 根据项目计划,已经顺利完成预定目标工作,并根据项目实施过程中的国内外新进展及课题的新发现,增加和扩展了部分内容。主要完成内容概要如下 1.建立了重复性好的LeY/sLeX糖蛋白的凝集素-亲和ELISA方法 研究中建立了酶偶联和化学荧光检测方法。 2.LeY/sLeX糖蛋白糖链结构分析,利用糖分析仪器MALDI-TOF-MS分析不同来源的子宫内膜样品,初步研究结果显示小鼠不同阶段糖链结构有差异,正在进一步重复和深入进行中。 3.根据文献报道,增加了课题相关的LeY/sLeX糖蛋白的功能研究,获得的结果包括整合素αVβ3含有LeY糖链,并且糖链影响αVβ3参与的黏附功能。两种不同接受性的子宫内膜存在差异性表达LeY。子宫内膜细胞CD82表达水平影响胚胎细胞与子宫内膜的黏附率。妊娠相关蛋白(PAPPA)受孕激素的基因表达上调作用。 4.发现了uPAR为sLeX骨架携带蛋白,课题组成员相关研究获得青年基金项目支持,并在进一步深入研究中。 5.在LeY/sLeX结合蛋白研究中发现了O-糖链在胚胎植入的生殖中可能发挥作用,并获国家自然科学基金项目。 6.由于肿瘤转移与胚胎植入等有相似性,开展了相关LeY和FUT4的工作。 7.学术交流广泛 应邀参加3次国际会议,并做报告。作为地方承办单位之一,举办第22届国际糖复合物大会(Glyco22, Dalian, 2013),扩大了糖生物学的学术影响。 8.培养研究生10名。 9.发表Sci论文5篇。