中文摘要：

肾上腺皮质癌恶性度高, 侵袭性强，目前对其发生的机制仍不明确。我们前期研究表明PCAF可能在肾上腺皮质癌中起抑癌作用，PCAF 3'UTR 3351C/T(SNP)与预后相关，3351C/T位于PCAF与miR-205的结合位点中，预测分析及荧光素酶实验发现，miR-205与PCAF基因3'UTR结合并发挥抑制作用，我们提出该SNP影响PCAF生物学作用的机制，即该SNP影响miR-205与PCAF互补配对或影响PCAF mRNA 稳定性。本研究拟进一步采用构建miR-205表达载体及慢病毒载体转染等，验证miR-205靶定PCAF基因；研究miR-205及PCAF在肾上腺皮质癌发生、进展的作用；阐明3351 C/T SNP在肾上腺皮质癌中的作用机制，探讨3351 C/T及miR-205表达与肾上腺皮质癌临床病理指标的关系，为肾上腺皮质癌治疗提供新的思路和理论依据。

结论摘要：

肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma，ACC)是原发于肾上腺皮质的恶性肿瘤，其恶性程度高，侵袭性强，早期诊断困难，目前对其发生的病理学机制仍不明确，生物学方面早期容易出现转移和复发。ACC的组织结构与形态和肾上腺皮质腺瘤（ACA）类似，在没有组织浸润或转移征象时，病理学鉴别ACC 与ACA较为困难，但是目前缺少有效的分子标记物将两者鉴别开来。近些年来，越来越多的证据表明miRNAS参与了肿瘤的形成过程。在本课题中，我们发现miR-205在ACC中表达明显低于ACA，miR-205不仅在体外细胞水平抑制ACC SW-13细胞株增殖、促进其凋亡，并且在动物体内抑制肿瘤生长，通过生物信息软件，Bcl-2被发现是miR-205靶基因之一，荧光素酶、qRT-PCR、 免疫组化、 western blotting实验证实Bcl-2在mRNA和蛋白表达水平上均与miR-205负相关。进一步机制研究表明miR-205抑制Bcl-2表达导致内凋亡途径中 Bax，cytochrome c，caspase-9 和caspase -3 因子的释放，从而促进了SW-13细胞凋亡。 PCAF(P300/CBP Associated Factor)是转录因子家族组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferases，HATs)的家族成员之一，参与细胞的分化、凋亡及肿瘤形成过程。本课题通过收集ACC及癌旁组织，采用免疫组化法及RT-PCR法检测组织中PCAF的表达水平；根据上述实验检测结果，利用细胞分子生物学技术沉默PCAF的表达，构建稳定下调表达的肾上腺皮质癌细胞株；通过建立裸鼠肾上腺皮质癌模型，在体内验证下调PCAF对肾上腺皮质癌细胞的生物学行为的影响；最后通过免疫组化法检测裸鼠瘤体组织中相关蛋白的表达情况，进一步探讨PCAF在ACC发生、发展机制中的作用。