新疆乌头属植物在民间作为草乌代用品使用已有很长历史,在治疗新疆地区多发的风寒湿各类病痛方面,有其独特优势。同时该属植物也是近年来危害新疆草场质量的主要毒害草,已给新疆畜牧业造成严重损害。因此,如何利用新疆乌头属植物药用价值,减轻其对草原的毒害,充分发挥其疗效迫在眉睫。但目前针对新疆乌头属植物的研究较少,使其开发利用受到一定限制。因此,本课题首先调查新疆乌头属植物的生物资源概况;在此基础上,采用RAPD分析和TLC指纹图谱技术,从形态组织、分子水平和化学成分三方面综合评价新疆乌头属不同种植物间以及与《中国药典》收载川、草乌类药材的亲缘关系;再采用UV法和HPLC测定新疆乌头属植物中生物碱含量,探明其化学资源状况。从新疆乌头属植物中筛查出分布范围广、蕴藏量丰富、与草乌类药材亲缘相近、生物碱含量高、具有潜在药用价值的品种,从而避免药用资源开发的盲目性,为新疆乌头属植物的合理利用提供依据。
Xinjiang Aconitum species;;medicinal resources survey;;Determination of content;the TLC fingerprint;RAPD analyze
本课题通过查阅文献和标本,实地调查了新疆乌头属植物的种类、分布、生境和蕴藏状况。初步查清新疆东疆地区、伊犁地区和乌鲁木齐周边地区乌头属植物的种类、分布、生态环境和蕴藏量,共发现5种乌头属植物,其中以新疆伊犁地区白喉乌头和准噶尔乌头资源分布较丰富,值得进一步合理开发利用。为初步探明新疆乌头植物的化学资源状况,本实验以乌头碱为对照品,溴甲酚绿为酸性染料,用紫外分光光度法测定了新疆乌头属植物中总生物碱的含量。同时,采用HPLC法测定了新疆乌头属植物中新乌头碱、次乌头碱、乌头碱的含量。样品含量测定结果表明新疆乌头属植物不同种、不同地区之间总生物碱和双酯型生物碱含量有一定的差异。已发现的5种乌头属植物中,白喉乌头、准噶尔乌头、空茎乌头的生物碱含量均高于草乌和川乌,其中白喉乌头和准噶尔乌头蕴藏量较丰富,具有潜在药用价值,值得进一步深入研究。在初步考察新疆乌头属不同种植物间的化学资源状况后,本研究筛选和优化了新疆乌头属植物薄层指纹图谱的色谱条件,所得图谱斑点清晰,分离度好。通过运用指纹图谱分析软件,建立了新疆乌头属植物指纹图谱共有模式,对新疆乌头属植物指纹图谱进行直观比较,并进一步对新疆乌头属植物指纹图谱进行相似度分析、聚类分析、主成分分析。同时,又建立了草乌和川乌药材的薄层指纹图谱共有模式,首次评价新疆乌头属不同种植物间以及与《中国药典》收载川、草乌类药材的亲缘关系。结果表明,新疆乌头属植物不同种之间化学成分有一定差异,大致可分为3类。其中白喉乌头、空茎乌头与草乌、川乌相似度较高;而准噶尔乌头与混合对照品相似度较高。经过提取新疆地区不同种乌头属植物DNA,进行RAPD分析,结果表明新疆地区乌头属植物中准噶尔乌头、白喉乌头与已有法定药材标准的川乌、草乌亲缘性较近,并找到其鉴别标志引物。综上所述,本研究首次以新疆乌头属植物生物资源与化学资源相结合的方式,初步调查了新疆东疆地区、伊犁地区乌头属植物药用资源,从新疆乌头属植物中初步筛查出了分布范围广、蕴藏量高、总生物碱