中国苹果树腐烂病(valsa canker)由于病原种类混乱不清、致病机理不明及防治难而成为苹果生产发展和出口贸易的主要限制因素之一。本研究首次结合形态学、生物学及分子生物学方法,明确了我国苹果树腐烂病菌主要致病种为Valsa mali,并首次区分出种下分类单元V. mali var.mali和V. mali var.pyri。并以病菌rDNA-ITS特异区序列设计引物,建立了灵敏度高、专化性强的巢氏PCR检测体系,已用于病害的分子检测和早期诊断。建立了以离体叶片和嫩梢为材料的病菌致病力快速评价方法,并揭示了病菌的致病力在种间和种内皆存在显著差异,变种Vmm多为强致病力种类;而致病力差异与菌株的地域来源没有明显相关性。通过组织学和细胞学研究技术,揭示了腐烂病菌在苹果树枝条上的侵染行为和发育过程分生孢子在24h内吸胀萌发并只能通过各种伤口和叶痕等入侵,菌丝可由皮层不断扩展至木质部;菌丝在寄主细胞间和细胞内扩展,引致寄主细胞质壁分离、细胞器解体、最终导致组织消解。利用免疫胶体金标记方法,发现寄主细胞壁的果胶明显减少,推测病菌分泌果胶酶降解了寄主细胞中胶层,从而有利于病菌的扩展。
英文主题词apple Valsa canker; identification; pathogenicity; infection procession; PCR detection