TMSG-1是1999年北京大学医学部首先克隆出的肿瘤转移抑制基因。我们前期研究首次发现TMSG-1含Homeodomain结构域的截短体可以入核,进一步发现TMSG-1蛋白具有核定位信号及DNA结合功能域,因此我们在国内外首次提出TMSG-1蛋白可能入核并有转录因子活性。本课题重点研究肿瘤细胞TMSG-1入核及机制和转录调节作用。包括①探测肿瘤细胞内TMSG-1蛋白自然状态或特定刺激下能否入核,TMSG-1与His融合进行免疫荧光及Westernblot检测其全长及截短体哪段可入核;②据生物信息学预测进行定点突变,确定TMSG-1核定位信号;③探讨TMSG-1入核机制,据生物信息学预测,免疫共沉淀探测与其相互作用的核输入蛋白;④荧光素酶报告基因检测TMSG-1是否具有转录调节功能;⑤染色质免疫共沉淀与基因芯片对其下游靶基因进行筛选,并通过荧光素酶、上调表达和RNA干扰验证转录调节作用。
英文主题词TMSG-1;Homeoprotein;Transcription;DCC;