基于S-腺苷甲硫氨酸探针的人胱硫醚β-合酶活性调控分子机制研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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基于S-腺苷甲硫氨酸探针的人胱硫醚β-合酶活性调控分子机制研究

项目名称：基于S-腺苷甲硫氨酸探针的人胱硫醚β-合酶活性调控分子机制研究
项目类别：青年科学基金项目
批准号：20802057
申请代码：B020703
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2009-01-01-2011-12-31

项目负责人：牛卫宁
负责人职称：副教授
依托单位：西北工业大学
批准年度：2008

中文摘要：

人胱硫醚β-合酶(CBS)是目前发现的唯一一个磷酸吡哆醛依赖的血红素结合蛋白，其突变可导致人高同型半胱氨酸血症,继而引发心血管疾病、老年痴呆症以及神经管畸形等多种疾病，但对CBS活性调控机制却所知甚少。本研究表达纯化了人野生型CBS和病人中最普遍存在的突变CBS(I278T)，并建立了一种不依赖于放射性同位素标记的酶活性测定新方法；通过CBS催化域和调控域的共表达实验确证了CBS调控域对催化域具有自抑制作用；表达纯化了S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)合成酶并对其进行了固定化研究，采用固定化酶催化合成了探针8-azido-AdoMet,通过光亲和标记技术确定了酶激活剂AdoMet在CBS上的结合位点为CBS催化域（CBS370-379aa),并非学术界普遍认为结合在CBS调控域；然后结合定点突变和分子对接模拟技术阐明了酶激活剂AdoMet对CBS活性调控的分子机制；另外在研究中还发现活性氧分子H2O2对CBS活性具有调控作用，进一步研究正在进行中。同时建立了固定化细胞和固定化酶法在升级规模下催化制备原料药AdoMet的工艺，本研究目前共发表相关论文10余篇，申请发明专利4项，授权2项。

中文主题词：人胱硫醚β-合酶；小分子探针；光亲和标记；S-腺苷甲硫氨酸；固定化酶

结论摘要：

英文主题词Human cystathionine-β-synthase(CBS);Small molecular probe;Photoaffinity labeling;S-adenosylmethionine(AdoMet);Immobilized enzyme

成果综合统计