中文摘要：

纤维素酶的活性在动物对青贮饲料的消化利用中起到重要作用。本项目针对目前纤维素酶使用过程中的诸多问题，采用生物技术手段筛选和构建出了高产纤维素酶的青贮用乳酸菌。研究用基因工程手段构建两株表达瑞士木酶CBHⅡ基因的工程菌株Rosetta（pETCBH）和NZ9000（pNZCBH），其中Rosetta（pETCBH）酶活达2.677U/mL；建立了一种新的Real-time RT-PCR分析方法，对外源基因在工程乳酸菌中的转录水平表达进行了准确的绝对定量分析；并利用pNPC法测定了工程菌的酶活力。另用荧光底物法从20种可利用纤维二糖的乳酸菌中筛选出10株产胞外β-葡萄糖苷酶的乳酸菌，并以L.plantarum KLDS1.0320酶学活性最高，该菌株粗酶液酶活的最适条件为pH4.8，37℃；在pH4.0，48℃下仍具酶活。将L.plantarum KLDS1.0320与其它乳酸菌种分别和绿色木霉来源的饲用纤维素酶对玉米秸秆进行联合发酵，发现该菌株产生的可溶性糖WSC含量最高，WSC的含量和纤维素酶的添加水平对乳酸含量和NDF、ADF降解均有显著影响。