中文摘要：

利用中国对虾同一家系个体携带一致的DNA分子指纹图谱，并可通过PCR检测实现精确识别的特点，结合大规模家系培育，以特定家系个体作为标志个体进行中国对虾放流回捕率估算。建立中国对虾分子标志家系放流效果评估技术体系，解决以往中国对虾资源增殖效果评估中回捕率无法精确估算的难题。项目首先在封闭池塘中进行中国对虾分子标志家系放流模拟进行标志与放流个体数量最佳比例研究；荧光标记微卫星四重PCR技术建立及识别标志个体精确性研究；分子标志家系推算回捕率准确性及标志个体掺入前后整个放流群体世代间遗传多样性水平变化等研究。在建立并优化分子标志家系推算回捕率技术体系前提下，分别在山东半岛胶州湾和乳山湾开展分子标志家系对放流效果评估试点，利用分子标志家系推算两地中国对虾放流回捕率，估算当地中国对虾野生资源本底。本研究将建立中国对虾增殖放流效果评估新方法，为科学指导放流提供依据。

结论摘要：

针对长期以来中国对虾放流效果无法精确评估的科学难题，课题提出了以中国对虾分子标志家系进行标记放流，利用微卫星分子标记进行个体识别，开展回捕率评估的思路。通过分子标志家系的培育、放流和识别，解决传统评估方法中标记个体无法大规模培育、物理标记伤害、规格限制、成本高、尤其是无法准确计算回捕样品中放流与野生个体数量的关键问题，建立了一种可以大规模培育标记个体、无损伤标记、标记终身携带并可以精确识别，进而可以实现从数量上实现回捕样本中放流个体与野生个体精确推算的目的，从而提供精确的放流回捕效果评估数据，为科学评估我国中国对虾放流效果，科学指导放流行为提供有价值的参考。课题首先建立了两组中国对虾荧光标记微卫星四重PCR技术体系用于进行个体识别/家系溯源研究，在父母本已知的条件下，任何一组的个体排除率都达到了99.99%以上的水平。然后，通过该模拟实验证实了1）任何一组四重PCR体系，在父母本已知的情况下，都可以实现个体的准确识别和家系溯源；2）家系与混养群体混养前后，其数量比例未发生显著的变化。2012年，开展了中国对虾分子标志家系放流效果评估在山东半岛胶州湾及渤海湾（天津汉沽）的试点。通过分别在胶州湾及渤海湾放流分子标志家系个体30万和20.4万尾，并分别在2507尾和3232尾回捕样品中检测到8尾和4尾分子标志家系个体，推算出两地2012年的中国对虾回捕率分别为2.70%和2.59%。这个结果比采用传统方法估算出的回捕率数据略低，但是更为准确。除完成课题要求的各项指标任务外，还完成了单亲条件下，个体识别和家系溯源准确性及对微卫星位点数量要求的研究；对放流过程中，不同生活史阶段渤海湾中国对虾群体遗传参数进行了研究。课题完成了要求的各项任务，主要包括微卫星分子标志家系的个体识别/家系溯源技术的建立；模拟放流验证；分子标记家系放流效果评估在胶州湾和渤海湾的试点。其它已有研究结果还包括已发表文章2篇，其中1篇为SCI（Aquatic Biology）收录，1篇为中文核心期刊（海洋学报）；接受（Accept）文章1篇，为SCI（Fisheries science）收录；小改（Minor Revision）文章1篇，为SCI（Russian Journal of Marine Biology）收录。申请专利2项，其中1项已获授权。培养硕士2名。