氧化应激/低氧反应性基因表达增强是影响光动力疗法(PDT)治疗肺癌疗效的重要原因。肺癌细胞可表达脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1),其具有DNA 损伤修复和氧化还原双功能,是低氧及氧化应激诱导细胞凋亡、坏死的重要保护基因,推测与PDT 治疗肺癌疗效有关。本项目选用A549 人肺癌细胞株为研究对象,利用体外细胞培养和裸鼠移植瘤模型,通过克隆并构建人APE1 全长cDNA 序列真核表达载体和缺氧反应元件调控的APE1siRNA 表达载体,运用cDNA 微阵列分析、荷瘤生长曲线观察、碱性单细胞凝胶电泳、激光共聚焦扫描等技术,阐明APE1 基因在PDT 治疗肺癌中的作用。该项目突出意义在于从双功能基因APE1 角度探讨肺癌细胞耐受PDT 所致缺氧和氧化应激的分子机理,并以期缺氧组织特异性APE1siRNA 表达载体能有效降低肺癌细胞对PDT 的耐受性,为今后与PDT联合治疗肺癌提供理论依据。
英文主题词Tumor; PDT; DNA repair genes; Clone; RNA interference