中文摘要：

EGFR-TKIs对NSCLC靶向治疗存在耐药现象。NSCLC细胞的EGFR表达水平、激活后磷酸化、胞吞内化、运输途径选择是EGFR信号通路能否持续作用的关键环节。我们的前期研究发现TKI敏感和耐药细胞EGFR、E-cad的表达水平和表达部位不同，且与对TKI的敏感性相关；组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲谷抑菌素A(TSA)可提高耐药细胞E-cad表达水平、影响其表达部位，并可恢复TKI耐药细胞对Erlotinib的敏感性。本研究拟在现有研究基础上，进一步以新的纳米量子技术结合免疫荧光染色定量分析TKI耐药和敏感细胞EGFR、E-cad的亚细胞定位和胞吞运输情况，以及TSA逆转TKI耐药性的机制是否与该环节相关，并寻找新的预测TKI疗效生物标记物。本研究将首次在EGFR胞吞运输环节开展EGFR-TKI耐药和耐药逆转机制研究，为新的TKI耐药型肺癌治疗策略提供理论基础，具有重要科学意义和广泛应用前景

结论摘要：

研究主要内容和重要成果 1、 研究明确了非小细胞肺癌EGFR-TKIs敏感细胞和耐药细胞之间E-cad的细胞表达部位和表达水平皆不同，可作为EGFR-TKIs疗效预测新的生物标记物。 TKI敏感细胞的E-cad蛋白和mRNA表达水平明显高于耐药细胞；且敏感细胞的E-cad 蛋白正常表达于胞膜；而耐药细胞胞膜上无表达，部分细胞胞质中异常表达。 2、 TSA可提高EGFR-TKI耐药的NSCLC细胞株的TKI敏感性；其作用机制与影响E-cad的细胞表达部位、表达水平相关。Erlotinib和TSA联合应用对TKI耐药细胞的生长增殖抑制、凋亡诱导、细胞周期阻滞效应具有明显协同增效作用。TSA单用或联合应用Erlotinib可以上调TKI耐药细胞E-cad的蛋白和mRNA 表达水平；且明显增加了耐药细胞的E-cad 蛋白的细胞膜表达。TSA通过Wnt7a/β-catenin信号通路诱导耐药细胞E-钙黏蛋白表达上调；影响E-Cad的细胞表达部位是提高敏感性、逆转细胞TKI耐药的主要机制之一。 3、 TKI敏感细胞和耐药细胞的EGFR胞内运输途径选择机制明显不同。与敏感细胞比较，耐药细胞的EGFR胞吞内化受体降解失活的速度较慢，受体回流再循环至细胞膜上重复利用增加。TSA可影响EGFR胞吞内化后的亚细胞定位，调节耐药细胞EGFR受体运输途径，减少早期胞含体再循环回流到细胞膜的运输，促进由早期胞含体到晚期胞内体／溶酶体的运输，不仅减少了受体回流再利用，而且促进了降解失活。TKI通过影响EGFR信号持续时间和作用程度的这一关键环节，降低EGFR下游信号通路的作用，进而逆转EGFR-TKI的耐药细胞的TKI敏感性是可能机制之一研究结果参加美国胸科学会壁报展出，课题协助培养博士研究生1名，硕士研究生2名，发表国际刊物文章1篇（SCI收录）