中文摘要：

胶质瘤辐射敏感性的调节机制仍不清。研究显示，细胞内DNA 损伤应激反应是决定细胞辐射敏感性的重要因素。我们前期进行的NDRG1与胶质瘤的研究，发现NDRG1与胶质瘤预后密切相关。我们还发现化学物质诱导胶质瘤U251细胞DNA 损伤后，NDRG1出现表达量的升高和核转位现象，提示NDRG1 基因参与了胶质瘤细胞DNA 损伤后的应激反应。而且增强NDRG1 在U251细胞中的表达后，X 射线照射后U251细胞的平板克隆形成率显著降低。我们推测，NDRG1 可能参与胶质瘤细胞辐射敏感性的调节。本研究拟利用基因转染技术、RNAi技术调变NDRG1的表达，借助多种体内外实验方法明确NDRG1是否对胶质瘤细胞的辐射敏感性具有调节作用；同时分析胶质瘤辐射敏感性相关分子的表达变化以及NDRG1与其的相互作用；利用蛋白质双向电泳、基因芯片和生物信息学分析研究NDRG1 调控胶质瘤细胞辐射敏感性的分子。

结论摘要：

胶质瘤辐射敏感性是制约临床疗效的主要因素。研究显示，细胞内DNA 损伤应激反应是决定细胞辐射敏感性的重要因素。我们前期进行的NDRG1与胶质瘤的研究，发现NDRG1与胶质瘤预后密切相关。我们还发现化学物质诱导胶质瘤U251细胞DNA 损伤后，NDRG1出现表达量的升高和核转位现象，提示NDRG1 基因参与了胶质瘤细胞DNA 损伤后的应激反应。而且增强NDRG1 在U251细胞中的表达后，X 射线照射后U251细胞的平板克隆形成率显著降低。在本研究中，我们利用基因转染技术、RNAi技术调变NDRG1的表达，借助多种体内外实验方法证明了NDRG1对胶质瘤细胞的辐射敏感性具有调节作用；分析明确了胶质瘤辐射敏感性相关分子的表达变化以及NDRG1与其的相互作用；利用芯片技术分析发现miR-650是NDRG基因调控胶质瘤细胞辐射敏感性的相关分子之一。而且同时过表达NDRG1和NDRG2后miR-650表达显著降低且可能为NDRG1和NDRG2协同作用的靶分子以增强辐射敏感性。转染miR-650人工合成模拟物后NDRG1和NDRG2的表达均下调，且NDRG1和NDRG2mRNA3'UTR区均具有miR-650的结合位点，说明miR-650可能通过直接结合抑制NDRG1和NDRG2的表达。据此，我们提出了NDRG1和NDRG2协同抑制miR-650并形成正反馈环路增强胶质瘤细胞的辐射敏感性的推论，这可以加深对NDRG基因家族和胶质瘤辐射敏感调控作用的认识。