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胚胎脑发育的分子机理:lgl2(late gestation
  • 项目名称:胚胎脑发育的分子机理:lgl2(late gestation
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30470854
  • 申请代码:C07
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2005-01-01-2007-12-31
  • 项目负责人:陶涛
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:厦门大学
  • 批准年度:2004
中文摘要:

真核细胞中大分子(蛋白质和核酸)在细胞核与细胞质之间的转移,是细胞最重要的功能之一. lgl2蛋白质是细胞核质转移蛋白受体家族(importin b superfamily)的一个新成员,也是目前在这个家族里所发现的唯一受发育时期和激素调控的细胞核质转移受体蛋白(9),也是唯一发现的其细胞核质转移的速度受发育调控的细胞核质转移受体蛋白(10).本研究将从蛋白质在细胞核与细胞质之间转移的角度,通过制备抗lgl2的抗体,用免疫组织染色和间接免疫荧光染色的方法,分析内源lgl2蛋白质在胚胎脑组织和脑细胞中的分布及其变化的规律; 用Northern和Western的方法,分析LGL2基因在胚胎脑组织里的表达规律;通过蛋白组学的方法(酵母双杂交和免疫沉淀),从胚胎脑cDNA文库和胚胎脑组织的裂解悬浮液中,分离与lgl2相互作用的蛋白质.通过分析lgl2的生物学功能,了解胚胎脑发育的分子机理.

结论摘要:

在本研究中,我们通过表达和纯化全长lgl2/importin13蛋白质,我们制备了抗lgl2/imp13多克隆抗体,制备方法已申请国家发明专利。用这个抗体, 我们研究了内源lgl2/imp13蛋白质在小鼠胚胎脑组织中的分布,发现lgl2/imp13在胚胎脑中的分布受到发育过程的调控,在发育早期,蛋白质主要分布在细胞质里,而在发育的后期,蛋白质主要分布在细胞核中。通过酵母双杂交实验,我们从胚胎人脑组织cDNA文库中分离到一批与lgl2/imp13相互作用蛋白质,并对其中的Arx蛋白质(aristaless homeobox-related)在lgl2/imp13的调节下入核的分子机理进行了系统的研究,发现了Arx入核的分子机理。在本项目的执行过程中,我们还对importin beta 家族的蛋白质的表达调控和分子进化的规律进行了研究。与此同时,我们还制备了myopodin蛋白质多克隆抗体,发展了新的分析芯片数据的网页,并绘制了人类26S蛋白水解小体亚基间的相互作用图谱。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
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  • 2
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