本体觉是指肌腱、关节等运动器官本身在不同功能状态时所产生的深感觉。与躯干和四肢不同,口面部本体觉信息在中枢内的传递和调控机制一直未阐明。尤其是GABA对口面部三叉神经本体觉信息传导通路上的初级神经元- - 三叉神经中脑核(Vme)神经元的调控机制尚不明了。本项目拟以大鼠Vme神经元为研究对象,综合应用脑片全细胞记录结合细胞内标记、免疫荧光组织化学多重染色、单细胞膜片钳以及细胞内钙离子测定等技术,研究GABA及其受体激动剂和拮抗剂对Vme神经元的作用,搞清对GABA起反应的Vme神经元的形态学和化学解剖学特征,将神经元对GABA的反应性与其形态学和化学解剖学特征对应起来,并研究5-HT对GABA反应进行调控的作用机理和胞内信号转导机制。本研究旨在从形态和机能上阐明GABA参与口面部本体觉信息传递的调控机制,并为进一步从分子水平探讨口面部本体感觉的产生和调控的本质提供线索。
本项目以SD大鼠和GAD67-GFP基因敲入小鼠的Vme 神经元为研究对象,综合应用脑片全细胞记录结合细胞内标记、免疫组织化学、免疫荧光组织化学和免疫电镜多重标记、单细胞膜片钳等技术,观察了Vme假单极神经元的基本电生理学特性并对其进行了细胞内标记;研究了GABA 及其受体激动剂和拮抗剂对Vme 神经元的作用,首次报道了囊泡膜谷氨酸转运体在大鼠Vme 生后发育中的表达变化及5-HT、SP能神经终末与Vme 内GABA能神经元之间的联系。主要结果(1)形态学类型相同的Vme假单极神经元的电生理学特征也具有多样性;(2)突触前终扣内释放的GABA可通过与分布于突触后的GABAA受体的结合,对Vme神经元的活动发挥直接的兴奋性作用;(3)这种兴奋性作用的分子基础可能与NKCC1在成年后的持续高表达有关;(4)从来自Vme神经元的咬肌终末向三叉神经运动核神经元传递面口部本体觉信息的过程中,谷氨酸发挥着十分重要的作用;(5)5-HT能、SP能和谷氨酸能神经终末不仅对Vme内的初级神经元发挥直接的调控作用,还可能通过影响其内的GABA能中间神经元,间接对本体感觉信息的传递发挥调控作用。