本项目运用RNAi、SQ RT-PCR、免疫荧光、流式细胞和Western Blot 等技术,探讨Sirt1调控猪前体脂肪细胞凋亡的分子机理。获得如下结果(1)Sirt1在猪各组织中均有表达,在前体脂肪细胞分化和凋亡过程中持续表达;(2)100 μmol/L白藜芦醇显著抑制猪前体脂肪细胞分化,200 μmol/L白藜芦醇显著的促进脂肪细胞的凋亡,并上调caspase-3,bax,p53,Sirt1等mRNA和蛋白的表达,同时下调bcl-2和NF-kB的表达(3)200-400 μmol/L烟酰胺显著促进猪前体脂肪细胞分化,同时抑制前体脂肪细胞凋亡,并下调Sirt1,bax,caspase-3mRNA的表达,同时上调bcl-2,NF-kB,mRNA的表达;(4)Sirt1通过调控其靶基因FoxO1 和脂肪细胞标志基因来影响猪前体脂肪细胞的分化。(5)Sirt1通过调控凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2、Bax、NF-κB和c-Myc等的表达抑制猪前体脂肪细胞凋亡。本研究结果有助于阐明从猪前体脂肪细胞凋亡的角度调控其体脂沉积,也为人类肥胖及其相关疾病治疗提供新的靶点和思路。
英文主题词pig; Sirt1; preadipocyte; Caspase-3; apoptosis