从活禽市场共分离到了23株Class I新城疫病毒,生物学特性鉴定结果显示分离毒株均为弱毒且其HN蛋白与Class II中的病毒株存在明显的抗原性差异,此为HN标记疫苗的研制提供了依据。根据分离株HN序列的分析结果,选择了Class I 毒株G33作为HN基因的供体,以Class II中基因VII型致弱株ZJ1FM为载体,构建了含有G33株HN基因的重组嵌合cDNA克隆pZJ1FM/G33HN。该克隆与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染表达T7 RNA聚合酶的BSR-T7/5 细胞后,成功获得了重组嵌合病毒ZJ1FM/G33HN。生物学特性鉴定结果显示该毒株毒力较弱,安全性好且在鸡胚中具有较高的繁殖性能;试验鸡与鹅的免疫效力试验结果证明,该嵌合病毒免疫后对流行株的攻击能提供较强的免疫保护效力。血清学试验结果显示,ZJ1FM/G33HN免疫后所获血清与流行株HN 蛋白260至450位氨基酸表达产物的反应性较弱,而流行株抗血清与该表达产物反应性较强,因此,ZJ1FM/G33HN作为标记疫苗使用时,该段蛋白表达产物可用于疫苗免疫动物与流行株感染动物的区分。
英文主题词Newcastle disease virus; ClassI; ClassII; HN; Marked vaccine