中文摘要：

HBx能导致肝癌的发生，但具体机制尚不清楚。SMYD3是新近发现的一种组蛋白甲基转移酶，参与组蛋白甲基化修饰，且在肝癌组织中高表达，但其表达调控的具体机制不清。基于本项目资助，我们发现1.在HBV相关性肝癌组织中，HBx与SMYD3呈正相关表达；2.在不同肝癌细胞系中，通过RNAi及基因转染方法进一步证实HBx确实参与了SMYD3的基因表达调控；3.应用Chip、DNA-蛋白质沉淀技术筛选出了HBx作用的SMYD3基因调控区域的DNA序列(SD2)，而并非目前文献报道的远端启动子序列（SD6）；应用免疫共沉淀技术分析了HBx与RNA多聚酶Ⅱ的相互作用，并对比HBx阳性与阴性肝癌细胞中HBx及RNA多聚酶Ⅱ对SMYD3基因调控区域作用位点的变化；双荧光素酶报告实验结果显示SD2段包含有一个HBx作用的顺式作用元件，该元件定位于SMYD3基因上游-178bp到-203bp处，经转录因子数据库预测及基因转染、Chip证实，HBx可通过转录因子NeuroD发挥反式激活作用，并直接募集RNA多聚酶Ⅱ到SMYD3基因上游的上述顺式作用原件。该研究明确了HBx调控SMYD3的具体机制。