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甜菜谷氨酰胺合成酶基因特性及其调控途径的研究
  • 项目名称:甜菜谷氨酰胺合成酶基因特性及其调控途径的研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30471017
  • 申请代码:C1303
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2005-01-01-2007-12-31
  • 项目负责人:李彩凤
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:东北农业大学
  • 批准年度:2004
中文摘要:

选用甜菜三个典型品种,应用hoagland培养和田间试验相结合的方法,提出调控GS的途径,并探索编码GS的基因特性及其表达与调控,对GS基因表达及表达时环境条件影响的机制提供分子生物学解释。探讨这一问题,可打破当前孤立研究酶活性、基因调节的局面,在栽培、生理和分子生物学交叉点上获取新的知识,形成我国在甜菜这一领域的一定优势,对丰富作物学科理论有很大的学术价值。可为品种资源鉴定和利用、选育高同化氨品

结论摘要:

应用Hoagland培养研究了温度、氮素、Mg2+、pH四个因子及其交互作用对GS酶活性的调控。建立了四个因子与甜菜苗期根部和叶片中GS活性的回归方程,并进行模拟、寻优,提出了调控GS酶活性的途径;从甜菜基因组中克隆了甜菜GS1基因全长序列,长度为9606bp。此基因序列包含13 个外显子被12 个内含子分隔开。外显子区与已公布的GS1mRNA 序列相似性为99.5%,与RT-PCR得到的GS1cDNA序列的相似性达99.9%。GS1cDNA与已公布的GS1mRNA 序列相似性达99.6%。获得GS2cDNA(长度为1296bp),测序结果与已公布的GS2mRNA序列相似性达99.9%。通过生物信息学方法分析GS1蛋白的结构和功能,GS1在大约50-70, 120-135,180-200 aa的地方有保守序列,蛋白PI为5.30,Mw为39092Da,疏水性分析,甜菜GS1蛋白有两个峰值,分别位于氨基酸残基的86-95,225-240区域。GS1蛋白的催化域在氨基酸残基15-100aa。通过放线菌素和环己亚胺调控,对GS-mRNA定量分析表明GS基因表达受控于转录水平和翻译水平。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 6
  • 1
  • 0
  • 0
  • 1
会议论文
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