本项目通过激光捕获显微分离技术分别获取小鼠牙胚发育早期的牙源性上皮组织和间充质组织,采用双向电泳、多级质谱和数据库的蛋白质组研究方案,全景式描绘牙胚发育早期的蛋白质谱,分析牙胚发育初期不同时段不同部位的上皮和间充质的蛋白质在数量、种类、含量、组合上的动态变化,探讨决定牙齿发生和牙齿形态的综合因素,为进一步阐明牙胚发育调控网络的分子机制提供理论依据,从而为人工再造牙齿奠定基础。
本研究通过激光捕获显微分离技术获取小鼠牙胚发育早期即牙胚发育启始期(E11.5)、蕾状期(E13.5)的牙源性间充质组织,采用双向凝胶电泳、质谱分析及生物信息学分析等比较蛋白质组学研究方法分析鉴定差异蛋白,结果分析发现E13.5组8个蛋白点明显上调,E11.5组5个蛋白点发生明显上调,提示牙胚发育启始期与蕾状期间充质细胞蛋白质表达存在差异,为阐明牙胚早期发生的分子机制奠定了一定的基础。同时本研究还对牙胚发育中期外胚间充质干细胞向成牙本质细胞的分化进行了研究,采用差异消化贴壁法分离和纯化培养SD大鼠颌突外胚间充质细胞,在牙胚细胞条件培养液(TGC-CM)中培养诱导其向成牙本质样细胞分化,并采用蛋白质组学的研究方法分析比较诱导前后细胞蛋白质组的变化,从而为揭示外胚间充质干细胞向成牙本质细胞分化的分子机制提供一定的理论依据。