发展蛋白质多维分离、在线酶解以及质谱鉴定的集成化技术平台对于提高蛋白质组高通量研究的准确度和可信度至关重要。为解决该平台中存在的色谱流动相与蛋白质酶解环境不匹配以及基于在线原位聚合整体材料的酶反应器刚性不足的问题,本项目新型有机纤维素膜接口,能够将1M的盐溶液置换到10 mM以下;制备了无机-有机杂化材料介质的微酶解反应器,能够在30 s和50 s内完成标准蛋白质和复杂蛋白质混合物的酶解;将制备的新型微酶解反应器以及有机膜接口,结合构建的SEC/RPLC蛋白质多维分离系统、多肽反相分离系统以及质谱,构建了集蛋白质分离、在线除盐、在线酶解、多肽分离以及质谱鉴定的一体化蛋白质分离鉴定平台。将其应用于鼠脑提蛋白质的分离鉴定,经3次分析,共鉴定了1476种蛋白质,整个系统峰容量可达5670。发表SCI论文5篇,申请专利3项。
英文主题词Proteomics; polymer monolithic; membrane interface; trypsin reaction; integrated system