中文摘要：

我们从柽柳中克隆到一个与抗逆性状相关的基因，其拟南芥中的同源基因被定义为常见的C2H2型锌指蛋白，通过分析我们推测此基因不属于常见的锌指类基因，而是全新的未知基因。本项目希望在以往工作的基础上深入研究。通过酵母单杂交及双杂交方法并结合表达谱分析等方法，系统分析此基因的抗逆性机理及功能。

结论摘要：

从柽柳(Tamarix hispida)根中的cDNA库中分离出一个与盐相关的类锌指基因（ThZFL）。ThZFL基因全长514bp，开放读码框自103位的ATG起，止于421位的TAA，为318bp，共编码105个氨基酸，推测其分子量为11.25kD，等电点pI为9.97。对其进行生物学信息分析，这个基因与动物锌指蛋白有部分相似性。 Northern blot 分析表明盐和渗透剂处理都提高了ThZFL在柽柳根部的表达，也能被ABA诱导。亚细胞定位表明ThZFL蛋白是定位在细胞壁中的蛋白。ThZFL基因启动子驱动GUS基因表达，GUS活性显示该启动子的表达部位在幼苗的整体，叶脉和毛状体表达显著，但在茎尖生长点处表达微弱，推测ThZFL基因主要在成熟组织中发挥抗逆作用。 将ThZFL基因克隆到酵母表达载体pYES2中，转化酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）中，空载体pYES2转酵母为对照。分别用NaCl和甘露醇胁迫处理转ThZFL与对照酵母，表明ThZFL基因对盐和渗透有抵抗能力。转基因植株GUS活性检测表明，拟南芥幼苗几乎整株表达，幼嫩的叶片和茎尖分生组织表达较弱，叶脉表达强一些，而老叶中GUS活性明显减弱，同时还发现毛状体中GUS表达较强。 为进一步研究ThZFL的功能，用农杆菌介导法将ThZFL基因转入烟草中，以GUS基因作为对照，得到了转基因烟草。PCR、Southern 杂交和Northern杂交检测表明ThZFL和GUS基因分别整合到烟草基因组中，并能够表达。选取3个转ThZFL基因株系的种子及叶片进行了非生物胁迫实验，转GUS基因及非转基因烟草作为对照。分析逆境胁迫条件下非转基因、转GUS基因植株和转ThZFL基因植株种子发芽率、相对生长量及丙二醛（MDA）含量。结果显示，胁迫条件下，转ThZFL基因的发芽率、相对生长量明显高于对照，丙二醛含量低于对照。这些结果表明ThZFL的过表达提高了转基因植株的抗盐和耐渗透能力。