目前三维显微成像技术有激光扫描共焦显微技术(LSCM)和计算光学切片显微成像技术(COSM)两种。与LSCM技术相比,后者具有图象质量高、对样本不产生漂白现象、价格便宜等优势。国外已有研究者开始深入研究该项新技术。但国内还没有对该领域引起足够的关注。 COSM技术的核心问题是已知样本在深度方向上的模糊序列图象,在系统的噪声模型和点扩展函数未知的情况下,运用信号处理、图象复原、信息光学等理论,如何正确真实快速地恢复出样本的三维图象。本研究围绕核心问题开展以下工作(1)广义三维可变的点扩展函数(PSF)的估计理论;(2)系统噪声模型研究;(3)序列图象解卷积算法研究(4)COSM与LSCM的对比研究;(5)系统的性能优化研究。本研究将取得一系列的理论和技术成果,力争在显微三维成像技术上有突破性的进展,开创国内COSM技术的新局面,为工作的进一步开展和应用系统的建立打下扎实的基础。
计算光学切片显微三维成像技术(COSM)是三维显微成像技术的研究热点,具有重要应用价值。本课题取得了以下主要成果(1)分析了显微镜三维理论点扩展函数,与共焦显微方式进行了比较,提出了具有实用价值的三维高斯型点扩展函数模型;(2)根据小波理论,提出了一种新的精确估计高斯点扩展函数的方法;(3)提出了一种新的基于小波的层间点扩展函数预测算法,提出了改进的分块最近邻法;(4)提出了基于小波分解的逐点计算深度的改进频域预测复原算法;(5)改进了三维维纳滤波算法和三维增量维纳滤波复原算法;(6)提出了基于高斯点扩展函数模型的参数盲解卷积算法,具有计算简单、收敛较快等特点;(7)提出了基于图像分割和小波去噪的改进NAS-RIF算法,并应用在三维显微成像的复原中;(8)针对深度变化点扩展函数情况,提出了一种新的基于EM算法的最大似然图像复原算法,提出了基于深度变化点扩展函数模型的参数盲解卷积算法;(9)将神经网络、Markov随机场等理论应用在三维显微图像复原中,取得了不错的实验结果;(10)研究了COSM并行计算模型,并应用到主要解卷积算法中;(11)设计并研制了实用化COSM软、硬件系统。