中文摘要：

从人源性抗体噬菌体呈现文库中筛选抗-HBs抗体重链Fd基因和轻链基因，构建到腺相关病毒载体质粒上，生产重组腺相关病毒（rAAV－Fab）。通过直接肌肉注射手段将rAAV－Fab转染免疫抑制状态的小鼠，从基因、蛋白表达和整体水平观察免疫抑制状态下小分子Fab抗体基因的表达量、表达时间及安全性。阐明基因转染Fab抗体在免疫抑制状态小鼠体内表达的能力，为临床预防肝移植后乙肝复发提供新的思路。

结论摘要：

本课题在于探讨能否通过转染携带抗人乙型肝炎病毒表面抗原抗体HB基因的腺相关病毒（rAAV-HB）预防肝移植后乙型肝炎病毒再感染。 将一株经筛选的高特异性的抗人乙型肝炎病毒表面抗原抗体Fab段基因，三质粒共转染法成功完成腺相关病毒rAAV-HB构建，病毒滴度可达1012vg/ml。通过病毒腿部肌注转染，及肝脏门静脉灌注转染，比较选择转染方式。肌肉注射在局部肌肉组织有较高转染率，肝脏门静脉注射使肝脏转染有优势，但总的转染率前者高于后者。肌注转染rAAV-HB后，荧光免疫吸附法检测血中抗体HB表达含量，HB在血中较为稳定的表达，且HB的含量最低大于10IU/L，最高达到200 IU/L以上。免疫组化，western检测组织中HB的表达，肌肉组织表达持久且强，且转染后病理组织学检查无形态学改变。体内、外试验中HB可加速病毒清除率免疫保护，阻断抗原黏附，介导补体杀伤靶细胞，阻断HBV感染人原代肝细胞。因此，通过受体肌注转染rAAV-HB，产生持续高量的HB抗体分子，是预防肝移植后乙肝复发的有效方法之一。