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摘要端粒酶是肿瘤细胞保持端粒DNA长度稳定的最主要机制，但不是唯一的机制。研究发现某些缺乏端粒酶活性的肿瘤细胞也能够永生，这类肿瘤细胞保持端粒DNA长度稳定的机制被称为端粒延伸替代机制（alternative lengthening of telomeres，ALT）。本研究根据RNA干扰（RNA interference，RNAi）原理抑制体外培养的人喉鳞癌细胞系Hep-2的端粒酶活性，将端粒酶抑制后仍能存活的喉癌细胞继续培养，得到端粒酶阴性喉癌细胞系。检测正常喉癌细胞和RNA干扰后存活喉癌细胞的端粒酶活性测定、hTERT表达和APBs小体表达情况，进一步明确了端粒酶阴性喉癌细胞系的确立。研究端粒酶阳性及端粒酶阴性喉癌细胞端粒长度测定和端粒延长的机制，研究两种喉癌细胞体外侵袭性及裸鼠成瘤性变化，明确了两种细胞的端粒动力学差异和肿瘤生物学的差异。最后对两种喉癌细胞进行了差异蛋白质表达的研究，找到了端粒延长机制中的关键蛋白。本研究最终明确端粒酶阴性的喉癌细胞端粒维持的分子机制及关键蛋白，为以端粒为靶向的喉癌及同类型恶性肿瘤的基因治疗提供了新的方向。