新疆小花棘豆已成为危害草原畜牧业最为严重的一类毒草,严重影响畜牧业经济发展。利用苦马豆素具有抗肿瘤特性,合理开发小花棘豆、变害为利具有重要意义。本项目在前期研究工作并获得苦马豆素基础上,以马立克氏病淋巴瘤细胞系MSB-1构建细胞模型和动物模型,通过体外试验和体内试验,采用MTT比色法、细胞电镜观察法、荧光定量PCR法、免疫学试验等检测方法,从分子水平分析不同浓度的苦马豆素对细胞模型和动物模型中L-meq基因、meq基因、pp38基因表达水平影响,初步揭示苦马豆素具有杀伤肿瘤细胞和免疫调节的抗肿瘤分子生物学机制,为小花棘豆抗肿瘤活性深入研究提供理论依据和实验证据,同时也为马立克氏病防治提供理论参考。
Swainsonine;Marek’s disease virus;cancer cell;cytotoxicity;
鸡马立克氏病毒具有致肿瘤作用的疱疹病毒,作为研究病毒肿瘤病的动物模型得到病毒学界、医学界和兽医界的广泛重视,为诱导肿瘤形成提供了一个理想的研究模式。据资料介绍,小花棘豆中含有的苦马豆素具有抗肿瘤特性。本实验首先进行了苦马豆素(from synthetic,Sigma)单独以及联合顺铂施药情况下对肝癌细胞(HepG2细胞)和肺癌细胞(A549细胞)的抗肿瘤特性和协同抗癌药物作用的研究。采用细胞培养、MTT实验、协同抗癌药物实验等技术。为验证苦马豆素是否溶解于溶剂,进行了苦马豆素工作液的检测。本实验结果显示,苦马豆素(from synthetic,Sigma)对肝癌细胞HepG2、肺癌细胞A549未表现出明显抗肿瘤效果,而对照的药物,却表现出明显地抗肿瘤效果。根据以上实验结果,为进一步研究苦马豆素(sigma)对鸡马立克氏病毒的作用,首先进行了鸡胚成纤维细胞培养,确定细胞生长周期,并对苦马豆素、顺铂作用于鸡胚成纤维细胞引起细胞毒性的最小剂量进行了确定。按照实验方案,观察苦马豆素、顺铂对鸡马立克氏病毒作用情况。本次实验结果显示,以苦马豆素作用于鸡胚成纤维细胞和鸡马立克氏病毒,未表现出良好抑制病毒作用。而作为对照的,却表现出明显地抑制、杀灭病毒的效果。