对采用mRNA差异显示技术已获得的中国野葡萄华东葡萄白-35-1的cDNA片段克隆测序,依据序列分析结果设计并合成特异引物进行cDNA 5'端快速扩增,得到cDNA全长片段3-4个,对其克隆测序分析,研究cDNA全序列结构,并确定抗白粉病基因功能,登录Genbank;构建抗白粉病基因的遗传转化表达载体;应用农杆菌介导法向品质优良但高感白粉病的欧洲葡萄品种佳利酿中进行转基因,经PCR检测、Southern blot检测、Northern blot检测、田间人工接种白粉病原菌检测,获得转基因植株,为葡萄"品质基因"与"抗病基因"的有效结合提供新方法和新技术,加速葡萄抗病优质育种的进程。在田间通过抗白粉病的中国野葡萄白-35-1与优质欧洲葡萄品种种间杂交,获得优质抗白粉病的葡萄新种质。
以高抗白粉病的中国野葡萄华东葡萄白河-35-1为材料,采用mRNA差异显示技术结合RACE技术克隆获得了中国野葡萄抗白粉病芪合成酶基因家族6个cDNA全长序列和抗坏血酸过氧化物酶基因cDNA1个全长序列;通过构建cDNA文库获EST序列,并用RACE技术获得了中国野葡萄抗白粉病5个未知功能基因cDNA全长序列,构建了中国野葡萄芪合成酶基因植物表达载体,进行了中国野葡萄抗白粉病芪合成酶基因和抗坏血酸过氧化物酶基因原核表达研究,建立了葡萄叶片再生体系,获得了转抗白粉病醛脱氢酶基因(ALDH)、芪合酶基因(STS)基因葡萄植株和中国野葡萄抗白粉病基因AC/B0313转基因烟草植株,获得了中国野葡萄抗白粉病基因的5个RAPD标记(OPO11-964、OPV13-661、OPW02-1756、OPB11-520、OPW05-766),对其测序并登录GenBank,获得了中国野葡萄抗白粉病SCAR标记SCO11-914;此外,以中国野葡萄抗白粉病基因作为亲本,进行杂交育种获得抗病杂种植株4147株。培养毕业博士研究生3人、硕士研究生9人,获发明专利2项,发表论文7篇,摘要1篇,其中SCI收录4篇。