茶叶苦涩滋味重是影响茶叶品质的重要因子之一。茶树中"单宁酶"基因的挖掘,是寻找及开发低涩味茶树资源的基础。植物单宁酶的性质乃至分子水平的了解几乎空白。我们前期研究首次从体外酶学角度证实了茶树中"单宁酶"的水解催化作用。本项目拟在前期工作基础上,利用蛋白质分离纯化、质谱鉴定等技术,对茶树中"单宁酶"进行分离纯化,并分析其酶学性质和蛋白质氨基酸序列信息;采用免疫组织化学技术,研究酶蛋白的亚细胞定位;采用功能克隆策略,从茶树转录组和基因组数据库中筛选酶基因的候选EST和ORF序列,克隆基因全长;通过原核表达验证基因功能。本研究旨在探明茶树中"单宁酶"的酶学特性,挖掘其基因信息;对于低涩味的优质茶树品种资源的高效利用和提高茶叶自然品质具有重要的参考和借鉴意义。
英文主题词tea plant;tannase;enzyme purified;enzymology characteristics;gene screening