本研究选用牦牛排卵前卵泡的颗粒细胞和黄体细胞为研究对象,采用流式细胞术、HE标记方法研究了体外培养的颗粒细胞和黄体细胞凋亡率和细胞分裂指数,用放射免疫分析方法检测了培养液中孕酮和雌激素浓度的变化,并用细胞超微和显微结构证实了细胞凋亡形态。结果表明,牦牛卵泡颗粒细胞可以在体外培养,并能够分泌孕酮和雌激素。FSH、Mel、P4和LH均具有促进颗粒细胞进入有丝分裂的增殖状态。FSH、Mel、P4 和E2能够抑制体外培养的颗粒细胞自发凋亡;FSH的抑制作用较强,且不会受到GnRH和Mel影响。Mel抑制细胞凋亡的作用极易受到GnRH、FSH和LH的影响,但是没有显著地抑制或叠加效应。GnRH能诱导体外培养的颗粒细胞凋亡,其促凋亡作用可被FSH完全逆转;而Mel、E2和P4仅能部分地缓解GnRH的促凋亡作用。FSH、Mel、LH和E2均能促进颗粒细胞分泌孕酮;Mel和E2同时处理则具有叠加促进孕酮分泌的作用。GnRH能强烈地抑制体外培养的颗粒细胞分泌孕酮,其抑制作用几乎不受FSH和LH影响;Mel仅表现部分地缓解了GnRH的抑制效应,但没有逆转。E2不仅可以完全逆转GnRH的抑制作用,进而与GnRH叠加促进颗粒细胞分泌孕酮。FSH、LH、Mel、GnRH和P4均能促进体外培养的颗粒细胞分泌雌激素.
英文主题词yak; cell cultivation; apoptosis; reproductive hormones