中文摘要：

本项目旨在构建带有完整kanr基因和无启动子的lacZ/tetr基因的双元报道微转座子Tn5，研究建立大肠杆菌与荧光假单胞菌之间的高效结合转移体系，将转座子插入荧光假单胞菌株M18染色体各基因中，构建M18插入突变体库。通过分析各插入突变体中lacZ表达的时间差别，区分前期与后期表达的基因，进一步筛选并克隆M18中的菌群传感（quorum sensing）应答基因，研究应答基因的功能及相互作用，以阐明菌群传感过程中的信号传递途径、细胞内基因表达的调节方式，主流代谢途径向次生代谢途径转移的机制。本研究对于在基因水平上研究细菌以及其它微生物的菌群传感机理具有重要意义，将为运用基因操作技术，控制代谢途径，构建稳定高产的目标工程菌株提供理论依据。

结论摘要：

本项目构建了带有完整kanr 基因和无启动子的lacZ/tetr 基因的双元报道微转座子Tn5，研究建立了大肠杆菌与荧光假单胞菌之间的高效结合转移体系，将转座子插入荧光假单胞菌株M18 染色体各基因中，构建M18 插入突变体库。通过分析各插入突变体中lacZ 表达的时间差别，区分前期与后期表达的基因，进一步筛选并克隆M18 中的菌群传感（quorum sensing）应答基因，研究应答基因的功能及相互作用。确认了所获6 个突变株的正确性，对6个基因作了克隆、测序、比对及功能的预测。有助于阐明菌群传感过程中的信号传递途径、细胞内基因表达的调节方式，主流代谢途径向次生代谢途径转移的机制。本研究对于在基因水平上研究细菌以及其它微生物的菌群传感机理具有重要意义，将为运用基因操作技术，控制代谢途径，构建稳定高产的目标工程菌株提供理论依据。