中文摘要：

多杀菌素是一种高效的新型绿色广谱生物杀虫剂，是刺糖多孢菌发酵产生的天然抗生素，由六种成 分组成，具有活性的是 Spinosyn A 和 Spinosyn D；其特点是使用安全，药效快，无环境污染，并因此获得了美国"总统绿色化学品挑战奖"。美国 Waldron 等人于 2001 年对多杀菌素生物合成基因簇的 基因分别进行了克隆和序列分析，并通过基因突变方法对不同的基因功能进行了深入的研究，但仍然不能确定控制多杀菌素生物合成的调控基因，原因之一是没有一个完整的基因簇克隆做为遗传操作工具。本项目拟采用最新的Fosmid文库克隆技术克隆全长的多杀菌素生物合成基因簇 以用于基因表达调控和结构的分析，并与微生物全基因组鸟枪法测序（whole-genome-shotgun sequencing）相结合，通过分析其生物合成代谢途径，确定其调控基因。同时，还将采用导入含有全长基因簇Fosmid克隆的方法增加细胞内的基因数目，从而达到提高多杀菌素产量的目。